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人员的无菌更衣系统以及室内废弃物传递出来的通道等。无菌室内的污染源，主要来自于无菌室内必要的操作人员和部分工艺设备，通常无菌室内操作人员的四周区域是洁净度差的区域，也是无菌技术中重要的控制内容。
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6.需要带入无菌室使用的仪器，食品净化工程，器械，平皿等一切物品，均应包扎严密，并应经过适宜的方法灭菌。7.工作人员进入无菌室前，必须用肥皂或消毒液洗手消毒，然后在缓冲间更换专用工作服，鞋，帽子，口罩和手套(或用75%的乙醇再次擦拭双手)，方可进入无菌室进行操作。
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10.每次操作过程中，均应做阴性对照，以检查无菌操作的可靠性。11.吸取菌液时，必须用吸耳球吸取，切勿直接用口接触吸管。12.接种针每次使用前后，必须通过火焰灼烧灭菌，净化工程，待冷却后，方可接种培养物。13.带有菌液的吸管，试管，培养皿等器皿应浸泡在盛有5%来苏尔溶液的消毒桶内消毒，24小时后取出冲洗。
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